Главная

Продукты серии BioREE разработаны для расширения возможностей применения метода сканирующей электронной микроскопии (SEM) в анализе образцов различных биологических объектов, а также для длительной консервации биологических образцов и проведения их последующего молекулярного анализа.

Доклад о BioREE на XX Международной научной конференции «Сточиковские чтения»

Деликатная подготовка к визуализации

Усиленные контраст и фиксация

Консервация для молекулярного анализа

Мы предлагаем Вам принципиально новый метод пробоподготовки, основными преимуществами которого являются:

  • Снижение время затрат на подготовку образца к SEM
  • Отсутствие необходимости жесткой фиксации образца, возможность работы с «нежными» объектами
  • Нетоксичность и простота в использовании применяемых реактивов
  • Более высокая информативность результатов, не имеющая аналогов в области применения SEM

Сущность методики BioREE для подготовки к SEM – лантаноидное контрастирование. Принцип действия нашего метода основан на обработке живых клеток ионами металлов группы лантаноидов (La, Nd, Sm и др.). Включаясь в метаболизм клеток и ингибируя их метаболические цепочки, эти тяжелые катионы маркируют внутреннюю структуру клетки, делая ее доступной для визуализации посредством SEM.

Классический СЭМ
(высокий вакуум, Pd/Au-напыление, режим SE)

Микрорельеф поверхности клетки
Микрорельеф поверхности клетки

Лантаноидное контрастирование
(низкий вакуум, подготовка набором «BioREE», режим BSE)

Внутренняя структура фрагмента клетки
Внутренняя структура фрагмента клетки

MMSC (мезенхимальная стволовая клетка) на культуральном пластике

В отличие от классической пробоподготовки для СЭМ, в нашей методике не применяются: тетраоксид осмия, тиокарбогидразид осмия, уранилацетат, глутаральдегид, параформальдегид

Лантаноидное контрастирование с дополнительной обработкой солями свинца

(низкий вакуум, подготовка набором «BioREEB», режим BSE)

Колония Staphylococcus aureus на эксплантированном дренаже
Колония Staphylococcus aureus на эксплантированном дренаже

Процесс пробоподготовки

В сравнении с традиционными методиками подготовки образцов использование наборов серии BioREE в значительной степени расширяет возможности метода SEM при изучении биологических объектов:

  • Визуализация ультраструктуры подповерхностного слоя при высокой разрешающей способности
  • Возможность идентифицировать клетки на сложных объектах и подложках за счет большей контрастности образца
  • Получение информации о сравнительном функциональном статусе клеток в образце
  • Обеспечение более точного химического микроанализа образца за счет отсутствия обеспечивающего электропроводность напыления

Ближайшими аналогами подобной визуализации биологических образцов являются системы флуоресцентной микроскопии сверхвысокого разрешения, в отличие от которых наш метод:

  • -более универсален и не связан с применением множества специфических контрастирующих агентов для визуализации различных структур клетки;
  • беспечивает визуализацию со значительно превосходящей глубиной резкости получаемых изображений при сопоставимых разрешающих способностях.

В связи с распространением методов корреляционной микроскопии несомненными преимуществами использования методики BioREE являются более высокая выживаемость флуоресцентных меток и минимизация процессов деформации при одновременной подготовке образца к SEM, что позволяет с большей точностью сопоставлять изображения, полученные разными методами.

Флуоресцентное окрашивание

Carl ZEISS Axio Vert. A1,  обработка Mito Tracker® Red
Carl ZEISS Axio Vert. A1, обработка Mito Tracker® Red

Лантаноидное контрастирование

Carl ZEISS EVO LS 10, BSE, 23 кВ, подготовка набором «BioREE»
Carl ZEISS EVO LS 10, BSE, 23 кВ, подготовка набором «BioREE»

Митохондрии в астроцитах человека