Продукты серии BioREE™ разработаны для расширения возможностей применения метода сканирующей электронной микроскопии (SEM) в анализе образцов различных биологических объектов, а также для длительной консервации биологических образцов и проведения их последующего молекулярного анализа.
Доклад о BioREE™ на XX Международной научной конференции «Сточиковские чтения»
Деликатная подготовка к визуализации
Усиленные контраст и фиксация
Консервация для молекулярного анализа
Мы предлагаем Вам принципиально новый метод пробоподготовки, основными преимуществами которого являются:
- Снижение время затрат на подготовку образца к SEM
- Отсутствие необходимости жесткой фиксации образца, возможность работы с «нежными» объектами
- Нетоксичность и простота в использовании применяемых реактивов
- Более высокая информативность результатов, не имеющая аналогов в области применения SEM
Сущность методики BioREE для подготовки к SEM – лантаноидное контрастирование. Принцип действия нашего метода основан на обработке живых клеток ионами металлов группы лантаноидов (La, Nd, Sm и др.). Включаясь в метаболизм клеток и ингибируя их метаболические цепочки, эти тяжелые катионы маркируют внутреннюю структуру клетки, делая ее доступной для визуализации посредством SEM.
Классический СЭМ
(высокий вакуум, Pd/Au-напыление, режим SE)
Лантаноидное контрастирование
(низкий вакуум, подготовка набором «BioREE», режим BSE)
MMSC (мезенхимальная стволовая клетка) на культуральном пластике
В отличие от классической пробоподготовки для СЭМ, в нашей методике не применяются: тетраоксид осмия, тиокарбогидразид осмия, уранилацетат, глутаральдегид, параформальдегид
Лантаноидное контрастирование с дополнительной обработкой солями свинца
(низкий вакуум, подготовка набором «BioREE—B», режим BSE)
Процесс пробоподготовки
В сравнении с традиционными методиками подготовки образцов использование наборов серии BioREE™ в значительной степени расширяет возможности метода SEM при изучении биологических объектов:
- Визуализация ультраструктуры подповерхностного слоя при высокой разрешающей способности
- Возможность идентифицировать клетки на сложных объектах и подложках за счет большей контрастности образца
- Получение информации о сравнительном функциональном статусе клеток в образце
- Обеспечение более точного химического микроанализа образца за счет отсутствия обеспечивающего электропроводность напыления
Ближайшими аналогами подобной визуализации биологических образцов являются системы флуоресцентной микроскопии сверхвысокого разрешения, в отличие от которых наш метод:
- -более универсален и не связан с применением множества специфических контрастирующих агентов для визуализации различных структур клетки;
- -обеспечивает визуализацию со значительно превосходящей глубиной резкости получаемых изображений при сопоставимых разрешающих способностях.
В связи с распространением методов корреляционной микроскопии несомненными преимуществами использования методики BioREE являются более высокая выживаемость флуоресцентных меток и минимизация процессов деформации при одновременной подготовке образца к SEM, что позволяет с большей точностью сопоставлять изображения, полученные разными методами.
Флуоресцентное окрашивание
Лантаноидное контрастирование
Митохондрии в астроцитах человека